病理組織切片制作

　　一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康慕M織切片技術(shù)是病理學(xué)中不可缺少的一個(gè)組成部分。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，能夠使學(xué)生了解和掌握病理組織切片的基本方法之一，即石蠟包埋的組織切片法。

    二、實(shí)驗(yàn)原理根據(jù)病變及檢查的要求，合理采集病料，經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟、包埋后進(jìn)行切片，在進(jìn)行染色得到結(jié)論。

　　一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

　　組織切片技術(shù)是病理學(xué)中不可缺少的一個(gè)組成部分。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，能夠使學(xué)生了解和掌握病理組織切片的基本方法之一，即石蠟包埋的組織切片法。

　　二、實(shí)驗(yàn)原理

　　根據(jù)病變及檢查的要求，合理采集病料，經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟、包埋后進(jìn)行切片，在進(jìn)行染色得到結(jié)果。固定是用化學(xué)藥品把組織原來(lái)的結(jié)構(gòu)保存下來(lái)，以便觀察。脫水是除去組織中的水分，以利于透明和浸蠟。組織的透明是便于透蠟包埋。包埋的是使石蠟透入組織內(nèi)部，把軟組織變?yōu)檫m當(dāng)硬度的包埋塊，以便切成薄片。***后使用切片機(jī)，將包埋塊中組織切成薄片。

　　三、主要儀器及試材

　　已固定好病料，石蠟，手術(shù)刀，手術(shù)剪，鑷子，脫水框，染色缸，梯度脫水酒精和透明劑一套，烘箱，切片機(jī)，毛筆，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精燈，三角架，大燒杯，溫度計(jì)，火柴，切片刀，記號(hào)筆或鉛筆。

　　四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟。

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　　采取的病理材料必須立即放入10％福爾馬林固定液中。

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　　組織經(jīng)固定后，尚含有多量水分，而水與透明劑苯、石蠟根本不相融合。必須先把組織中的水分除去。但脫水劑必須是與水在任何比率下均能混合的液體，脫水劑常兼有硬化組織的作用。***常用的脫水劑為酒精、丙酮等。

　　1．酒精 沸點(diǎn)78．4℃，為***常用的脫水劑。脫水能力強(qiáng)，并能使組織硬化，能較好地與二甲苯透明劑相混合。***終結(jié)果表明，只要脫水環(huán)節(jié)處理好，都會(huì)得到好的切片。脫水的程序?yàn)?0％一80％一95％一100％。各級(jí)酒精2—4小時(shí)，視材料的大小、厚薄而定。100％酒精有硬化組織的作用，時(shí)間不宜太長(zhǎng)，一般不超過(guò)3小時(shí)。腦組織、脂肪組織或疏松結(jié)締組織，脫水時(shí)間要適當(dāng)延長(zhǎng)。

　　2．丙酮 沸點(diǎn)為56℃。脫水作用比乙醇強(qiáng)，但對(duì)組織塊的收縮較大，主要用于快速脫水或固定兼脫水。脫水時(shí)間l一3小時(shí)左右。  

　　（三）透明

　　透明對(duì)組織有脫酒精及透明兩種作用。當(dāng)組織中全部為透明劑占有時(shí)，

　　光線可以透過(guò)，組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài)，此種現(xiàn)象稱為透明，具有這種作用的試劑稱為透明劑。常用的透明劑有：

　　1．二甲苯 是***常用的良好透明劑，不影響各種染色。二甲苯易溶于酒精，能溶解石蠟，也是封固劑，不吸收水，透明能力強(qiáng)，易使組織收縮、變脆，故組織塊在二甲苯中不宜久留，特別對(duì)小動(dòng)物組織材料必須嚴(yán)格控制好(各種器官的透明差異很大)，通常為半小時(shí)到1小時(shí)左右。

　　當(dāng)二甲苯透明時(shí)必須持組織放在專用二甲苯皿器中，這樣可減少透明時(shí)間，有利于組織透明徹底，在換組織塊透明時(shí)候，所用的鑷子等器具必須干燥，不得將水滴混入二甲苯中，因水滴易被組織吸收而影響透明程度，潮濕天氣更應(yīng)引起注意。

　　2．冬青油（水楊酸甲酯）為無(wú)色油樣液體，易溶于醇、醚及冰醋酸，難溶于水。透明速度較慢，數(shù)小時(shí)或數(shù)天。一般經(jīng)無(wú)水乙醇脫水后再入冬青油。

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